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奶牛母牛的胚胎移植技术

发布时间:2019-06-13

奶牛母牛的胚胎移植技术

奶牛母牛的胚胎移植技术

俗称借腹怀胎,是提高良种母牛繁殖潜力、加快品种更新的一项实用高新技术。

主要包括供体、受体的准备,供体的超数排卵与配种,胚胎的收集、检查、冷冻保存和移植等几个基本环节。

  1.供体、受体的准备供体、受体均要求为青壮年牛,膘情中等偏上,繁殖机能正常,一般应有2个以上正常的繁殖周期。 此外,供体应是良种,鲜胚移植时,供、受体发情要同步,数量比例要适当,一般为1:5-8为宜。

2.供体的超数排卵与配种牛每次发情后一般只排一个卵,利用外源性促性腺激素处理能使卵巢一次排出多个卵子,即为超数排卵技术。 通常在母牛发情周期的第9-14天肌肉注射FSH进行超排处理,连续注射4天,每日早晚各一次,总量为40-50毫克,剂量均等或递减,第三天的第五次注射时,同时注射PGF2a。

,一般在注射48小时后,母牛即发情排卵。 超排处理以后的发情供体母牛,用活率高、密度大的优良公牛精液配种,适当增加人工授精的次数,两次输精间隔8-10小时。

  3.胚胎的收集牛胚胎移植通常用非手术法,利用双通式导管冲卵器多次向子宫角注入冲卵液,反复冲洗回收桑椹至囊胚期胚胎。

  4.胚胎的检查在实体显微镜下从回收的冲卵液中检出胚胎,主要依据形态学进行分类,选发育阶段正常,外形匀称,卵裂球比较紧密的A、B级胚胎可供移植或冷冻保存。

目前,每头供体牛一般可获得8枚左右可用胚。

  5.胚胎的冷冻保存胚胎冷冻保存可以克服鲜胚移植受时间、地点等因素的限制,为胚胎移植技术推广应用和充分发挥其优势提供了保证。

冷冻方法有缓慢降温法、快速冷冻法和一步冷冻法等3种。

快速冷冻法因胚胎解冻后存活率及移植成功率较高,为目前生产中最常用的方法。

简要介绍如下:室温条件下,先将胚胎加入摩尔甘油冷冻液中脱水平衡20分钟,再装入毫升细管,然后将装有胚胎的细管放入程控冷冻仪中,0℃平衡10分钟,以1℃/分的速度降至-6--7℃,人工植冰并平衡10分钟,然后以℃/分的速度降温至-35--38℃,投入液氮保存。 解冻时从液氮中取出装胚胎的细管,立即投入37℃水浴中,并轻轻摆动,1分钟后取出即完成解冻过程。

然后用摩尔蔗糖PBS液分两步或一步法脱除冷冻保护剂使胚胎复水,最后移人PBS培养液中准备移植。   6.胚胎的移植将胚胎吸入毫升细管中,两端有小气泡固定保护。 采用直肠把握子宫颈法,利用卡苏枪非手术法将胚胎移植入黄体侧子宫角大弯的前端。 胚胎移植给受体后,要加强护理,移植后不要频繁地进行直肠检查,以防流产。 注意观察受体牛的返情情况,对于未发情的受体牛,应在移植2个月后通过直肠检查来判断是否怀孕。